О годе рожденья вопрос чуть заметен

[egovoru]

Великая битва по поводу абортов упирается, в конце концов, в вопрос о том, с какого момента считать плод человеком: с момента рождения, с момента зачатия - или с какого-то промежуточного момента между ними? По моему мнению, считать зиготу (оплодотворенную яйцеклетку) человеком не приходится, и вот почему.

Comments

[livelight]

А как сперматозоиды сортируют? Этак можно ненароком два с Y взять, а оно не жизнеспособно.

[egovoru]

Интересный вопрос! Я подозреваю, их никак не сортируют, а просто берут любые два, подсаживают в яйцеклетку, и смотрят, что получится. Если это оказывается YY, то развитие просто остановится на ранних стадиях. Потом, когда эмбрионы немножко подрастут, от них отрывают кусочек и секвенируют для определения пола.

Впрочем, я не специалист - может, и есть какие-то способы отсортировать сперматоизоиды по половой хромосоме? Попробую поискать это в этой статье и тогда напишу.

[egovoru]

Ага, вот пишут, что таки есть возможность отличить сперматозоиды, несущие X хромосому от несущих Y! Активация некоего их хеморецептора определенным лигандом приводит к тому, что первые начинают плыть медленнее, а вторые - нет, причем это не влияет на их жизнеспособность и способность к оплодотворению. Соответственно, их можно отсортировать по скорости движения.

методы разделения сперматозоидов

[kuzmitch2007]

Помимо разделения по скорости движения есть еще несколько методов, включая проточную цитометрию.

Re: методы разделения сперматозоидов

[egovoru]

А как последняя работает, т.е., какой именно параметр измеряют?

Re: различия интенсивности флуоресценции

[kuzmitch2007]

Differential fluorescence emitted by stained X- vs. Y-chromosome-bearing sperm enables sorting and collection of samples enriched in either X- or Y-bearing sperm for use to influence the likelihood that the offspring will be a particular sex.

The effectiveness of flow cytometric sorting of human sperm (MicroSort®) for influencing a child's sex
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25420620/

Conclusions: Flow cytometric sorting of human sperm shifted the X:Y sperm ratio. IUI, IVF/ICSI and FET outcomes were consistent with unimpaired sperm function. Results provide evidence supporting the effectiveness of flow cytometric sorting of human sperm for use as a preconception method of influencing a baby's sex.

Re: различия интенсивности флуоресценции

[egovoru]

Интересно, спасибо! Hoechst - стандартный метод окраски хромосом в фиксированных препаратах, но применение его для прижизненной окраски для меня новость. Правда, авторы пишут, что данные по числу наследственных дефектов будут предоставлены в отдельной статье, так что непонятно, насколько это безопасно.

Re: различия интенсивности флуоресценции

[kuzmitch2007]

В методиках флуорохромирования написано буквально так:

Окрашивание препаратов ДНК-специфичными
флуорохромами Hoechst 33258 и 4′,6-диамидино-2-
фенилиндола (DAPI) вызывает флуоресценцию хро-
матина в ядрах. Флуоресценция обусловлена встра-
иванием флуорохромов в малую бороздку ДНК. При
этом флуорохромы взаимодействуют с азотистыми
основаниями (четырьмя и более рядом стоящими dA-
dT-парами) и не взаимодействуют с однонитевой ДНК,
а также двунитевой РНК (Kapuscinski, Szer, 1979;
Schwei zer, 1981; Stokke, Steen, 1986; Sumner, 1990).

Re: различия интенсивности флуоресценции

[egovoru]

Да связываться-то эти краски связываются, вопрос в том, насколько они безвредны? Вики пишет так:

"Because Hoechst stains bind to DNA, they interfere with DNA replication during cell division. Consequently, they are potentially mutagenic and carcinogenic, so care should be used in their handling and disposal. Hoechst stain is used to sort sperm in livestock and humans. Its safety has been debated.[13][14]"

13) Ashwood-Smith, M.J. (1994). "Safety of human sperm selection by flow cytometry". Human Reproduction. Oxford University Press. 9 (5): 757-759. doi:10.1093/oxfordjournals.humrep.a138589. PMID 7929716.

14) Parrilla, I; Vázquez, J M; Cuello, C; Gil, MA; Roca, J; Di Berardino, D; Martínez, EA (2004). "Hoechst 33342 stain and u.v. laser exposure do not induce genotoxic effects in flow-sorted boar spermatozoa". Reproduction. 128 (5): 615-621. doi:10.1530/rep.1.00288. PMID 15509707.

Видно, в одной статье пишут, что вредно, а в другой - что нет.

Re: повреждение ДНК

[kuzmitch2007]

Работы идут, свойства флуорохромов изучаются. Этидиум бромид считается безусловно токсичным для суправитальной окраски клеток. В отношении Hoechst есть такое исследование

Re: повреждение ДНК

[egovoru]

"сегодня есть и иные матоды разделени Х и Y сперматозоидов без красителей"

Да, мне кажется, от этих красителей лучше держаться подальше. Этидиум вон теперь в лабораториях вообще не используют - есть менее вредные альтернативы.