Немножко о работе
Но у тебя СПИД, и значит, мы умрем...
Земфира
1 декабря:
-первый день зимы,
-
Костин день рождения,
-и профессиональный праздник: Всемирный день борьбы со СПИДом.
Одним из основных этапов диагностики ВИЧ инфекции является иммуноферментный анализ, или ИФА. Как же проходит исследование методом ИФА?
Сыворотка крови пациента вносится в лунку планшета, на дне которой сорбированы антигены. Они прочно взаимодействуют с антителами к ВИЧ, если таковые имеются в исследуемой сыворотке. Далее, к каждой молекуле антител к ВИЧ, "выловленной" из сыворотки пациента, прикрепляется фермент, который делает эти антитела видимыми, изменяя окраску раствора в лунке: чем больше в сыворотке антител, тем темнее окраска в лунке планшета.
Слева в лунках А1-D1 закапаны положительные контроли, E1-F1 - отрицательные. Оптическая плотность контрольных образцов должна уложиться в соответствующие пределы, указанные в инструкции к тест-системе (для определения антител в данном случае). В противном случае результаты исследуемых сывороток в оставшихся лунках G1-H12 не учитываются, и ислледование повторяют снова.
Если одна из лунок планшета окрасилась в темный цвет (например, в лунке A7 оптическая плотность выше критического значения), начинается процесс подтверждения положительного результата. На первом этапе исследование данной сыворотки повторяют в той же тест-системе в двух лунках - это позволяет исключить технические погрешности.
Если результат подтвердился - начинается второй этап - отсекаются ошибки, зависящие от качества тест-системы (степени очистки и свойств белков ВИЧ, пластиковых планшет, окрашивающих растворов, входящих в состав тест-системы). Для этого исследование проводится в двух других тест-системах ИФА, имеющих в своем составе белки самой высокой степени очистки, "отсеивающие" большинство ложноположительных результатов. Если хотя бы в одной из этих тест-систем получен положительный результат - начинается третья стадия - иммунный блоттинг.
Если иммуноблот оказался отрицательным - то это значит, что положительная реакция в ИФА-тестах была ложной или неспецифической, ВИЧ-инфекции нет; если положительный - в крови обнаружены антитела к ВИЧ, необходим четвертый, последний этап - повторный забор крови и повторное исследование, чтобы исключить техническую ошибку при заборе крови. Только после положительного результата по повторной сыворотке подводится окончательный итог: "антитела к ВИЧ - обнаружены", у человека - ВИЧ-инфекция.